Padronização de uma PCR para diagnóstico molecular de Microsporum canis em amostras de pelos e crostas de cães e gatos / Standardization of a pcr for molecular diagnosis of microsporum canis in samples of fur and crusts of dogs and cats

Objetivou-se neste estudo padronizar um protocolo de reação em cadeia da polimerase (PCR) para detecção de Microsporum canis em amostras de pelos e/ou crostas de cães e gatos. Foram selecionadas 48 amostras previamente identificadas por meio de cultura. Destas, 23 foram positivas para dermatófitos no cultivo. Padronizou-se a PCR a partir de primers desenhados para o alvo M. canis. Sessenta e um por cento (14/23) das amostras positivas para dermatófitos foram identificadas como M. canis em cultura. Desse total, 71,4% (10/14) apresentaram um fragmento de 218pb compatível com o esperado para a espécie fúngica alvo dessa reação. Observou-se uma sensibilidade de 71,4% e especificidade de 100% na PCR, além de uma boa concordância entre essas técnicas de diagnóstico (Kappa: 0,78; P<0,0001). O protocolo utilizado neste estudo apresentou alta especificidade na detecção de M. canis diretamente de amostras de pelos e/ou crostas de cães e gatos, viabilizando um diagnóstico mais rápido e específico, podendo esse protocolo ser empregado como um método confirmatório para agilizar a detecção de M. canis.(AU)

The aim of this study was to standardize a Polymerase Chain Reaction protocol (PCR) for the detection of Microsporum canis in fur and/or crusts of dogs and cats. 48 samples previously identified by culture were selected. Of these, 23 were positive for dermatophytes in culture. PCR was standardized from drawn primers whose target is M. canis. A total of 61% (14/23) of the dermatophyte positive samples were identified as M. canis in culture. Of this total, 71.4% (10/14) presented a fragment of 218bp compatible with that expected for the fungal species target of the reaction. A sensitivity of 71.4% and specificity of 100% in the PCR were observed, in addition to a good agreement between the techniques (Kappa: 0.78; P<0.0001). The protocol used in this study showed high specificity in the detection of M. canis directly from fur and/or crusts of dogs and cats, making possible a faster and more specific diagnosis. This protocol could be used as a confirmatory method, speeding the detection of M. canis.(AU)

Estimativa do intervalo pós-morte em um canino (Canis lupus familiaris Linnaeus 1758) pela entomologia forense em Cabedelo-PB, Brasil: relato de caso / Estimate of postmortem interval through forensic entomology in a canine (Canis lupus familiaris Linnaeus 1758) in Cabedelo-PB, Brazil: case report

O intervalo pós-morte (IPM) é um instrumento importante de diagnóstico relacionado à prática forense. O uso de insetos tem sido relatado como um modo eficiente para estimá-lo, quando o cadáver encontra-se em estágio avançado de decomposição. Objetivou-se com este trabalho estimar o IPM com base em evidências entomológicas em um canino. Foram coletadas larvas de moscas no cadáver e encaminhadas ao laboratório de entomologia, onde foram criadas e eclodiram adultos da espécie Chrysomya albiceps (Wiedemann, 1819). Somando-se os dados abióticos de temperatura e umidade relativa do local de coleta e do local de criação, estimou-se um IPM mínimo de 3,34 dias do momento da postura dos ovos pelas moscas até a coleta das larvas. Com base nos resultados obtidos, conclui-se que a entomologia forense, como ferramenta para estimativa do IPM, mostrou-se eficaz e determinante na elucidação do caso em questão.

The postmortem interval (PMI) is an important tool for diagnosis related to the forensic practice. The use of insects has proved to be an efficient diagnosis tool when the cadaver is in advanced decomposition stage. The objective of this work was to estimate PMI based on entomological evidence in a canine. Fly larvae was collected from the cadaver and forwarded to the Entomology laboratory. The fly larvae were reared and hatched adults of Chrysomya albiceps (Wiedemann 1819). With these insects and the abiotic data of temperature and relative humidity, from the places of collection and rearing larvae, a minimum PMI of 3.34 days from the laying of eggs by the flies until the time that we collected the larvae was obtained. The results show that Forensic Entomology as tool to estimate PMI is decisive and effective in the elucidation of the case.

Recuperaçäo de Brucella abortus do leite in natura procedente de vacas soropositivas dos municípios de Pedra e Venturosa - PE: aspectos de saúde pública / Recovery of Brucella abortus of the raw milk from animals having seropositive Pedra e Venturosa counties - PE

Com o objetivo de recuperar Brucella abortus do leite, utilizaram-se 14 amostras de leite in natura de fêmeas bovinas soropositivas para brucelose procedentes de sete propriedades rurais situadas nos municípios de Pedra e Venturosa - PE. As amostras de leite foram centrifugadas a 1431,04 g por trinta minutos, obtendo sobrenadante e sedimento que foram semeados em ágar brucela, contendo antibióticos e antifúngicos, isolando-se apenas uma amostra de Brucella abortus do sedimento, correspondendo a 7,14 por cento dos animais estudados. Os sedimentos obtidos da centrifugaçäo foram tratados com antibióticos e antifúngicos e inoculados em cobaias, por via intraperitoneal. Das vinte e oito cobaias inoculadas cinco (17,85 por cento) apresentaram reaçäo sorológica positiva nos testes de soroglutinaçäo rápida (SAR), soroaglutinaçäo lenta (SAL) e 2-mercaptoetanol (2-ME), demonstrando uma possível infecçäo destes animais pela Brucella abortus presente no leite, apesar do isolamento bacteriano em órgäos como baço, fígado, linfonodo, pulmöes e testículos ter sido obtido em apenas uma amostra. A pesquisa de aglutininas anti-Brucella abortus em soros de humanos observou-se que oito amostras (21,05 por cento) apresentaram reaçäo de 1:100, em pelo menos uma das provas utilizadas na detecçäo de anticorpos, sugerindo possível infecçäo dos humanos através do consumo do leite e subprodutos in natura.